土拉弗朗西斯菌的培养需要在专业实验室的生物安全三级BSL-3条件下进行,采用特殊培养基和严格的环境控制。
该菌对营养要求较高,常用培养基包括改良马丁琼脂、巧克力琼脂或含半胱氨酸的巯基乙酸盐肉汤。培养温度通常设为37℃,并需维持5%-10%的CO₂环境以促进生长。由于生长缓慢,菌落可能需48-72小时才可见,呈灰白色、光滑的小菌落。为提高分离率,临床样本如血液、组织或溃疡分泌物需预处理,部分情况下需接种到敏感动物模型如小鼠体内增菌。
操作时必须严格遵守生物安全规范,避免气溶胶产生。实验室人员需穿戴防护装备,包括N95口罩、护目镜和正压防护服。培养废弃物需高压灭菌处理,实验区域需定期消毒。该菌为高致病性病原体,未经专业培训严禁操作,相关研究需向卫生部门报备。误操作可能导致严重感染,出现发热、淋巴结肿大等症状,需立即就医并报告实验室暴露事件。
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